４．４ ケイ素（ケイ酸）
４．４．１ 塩酸法
Ａ 適用範囲
ケイ酸質肥料を主な対象とするが、その他リン鉱石などにも応用することができる。本法は一般に４．４．２より迅速性などにおいて劣るが、ケイ素全量などの定量にはかえって適用しやすい。
Ｂ 試料液の調製
ａ ケイ素（ケイ酸）全量
１）フッ素を含有しない場合
分析試料０．５～１ｇをめのう乳鉢に正確にとりよく粉砕し、５倍量以上の無水炭酸ナトリウムまたは無水炭酸ナトリウムと無水炭酸カリウムとの等量混合物を加えよく混合して白金るつぼに移し、初めは低温で加熱し次いで徐々に強熱し、時々白金るつぼを揺り動かし内容が完全に融解していることを確かめ約３０分後加熱をやめる。放冷後白金るつぼとともにビーカーに入れその固塊を熱水で溶かし、白金るつぼを洗い去り塩酸を加えて強酸性とする。
２）フッ素を含有する場合
分析試料０．５～１ｇをめのう乳鉢に正確にとりよく粉砕し、以下前項１）により融解し、固塊を熱水で溶かし白金るつぼを洗い去り定量用ろ紙でろ過し熱水で洗浄する（この沈殿をＡとする）。次にそのろ液に炭酸アンモニウムの粉末約２ｇを加え約４０℃の水浴中で１時間加温し、放冷後更に炭酸アンモニウム約１ｇを加え一夜間放置してケイ素、アルミニウムなどを沈殿させこれを定量用ろ紙でろ別し、ろ紙上の沈殿は約２％炭酸アンモニウム液で洗浄する（この沈殿をＢとする）。ろ液は蒸発乾固して過剰の炭酸アンモニウムを分解除去し、残留物は少量の水に溶かしフェノールフタレイン〔４．１．５．１．Ｂ．５）．ｉｉｉ）による〕を指示薬としてその紅色が消失するまで硝酸を滴下して中和し（液温が高いときは冷却して中和する）、更に中性を保ちながら蒸発乾固して、これに酸化亜鉛１ｇに相当する亜鉛－アンモニア液（酸化亜鉛１ｇ及び炭酸アンモニウム２ｇを水２０ｍｌに溶かし、アンモニア水２０ｍｌを加えて沈殿をことごとく溶かす）を加え煮沸して炭酸アンモニウムを除き、アンモニアの臭気がまったくなくなってから煮沸をやめ定量用ろ紙でろ過し熱水で洗浄する（この沈殿をＣとする）。このようにしてフッ化物を取り去った沈殿Ａ・Ｂ・Ｃを集めろ紙とともに乾燥・強熱灰化したのち、ビーカーに入れ塩酸を加えて強酸性とする。
ｂ 可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）ケイ素（ケイ酸）
分析試料１ｇを２５０ｍｌのメスフラスコに正確にとり、３０℃の０．５Ｍ塩酸１５０ｍｌを加え１分間３０～４０回回転の振り混ぜ機で１時間振り混ぜたのち（浸出中は３０℃に保つこと）、速やかに常温に戻し標線まで水を加えて直ちに乾燥ろ紙でろ過する。
ｃ 水溶性ケイ素（ケイ酸）
分析試料２．５～５ｇを５００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、水約４００ｍｌを加え１分間３０～４０回回転の振り混ぜ機で３０分間振り混ぜたのち、標線まで水を加えて直ちに乾燥ろ紙でろ過する。
Ｃ 定量
試料液の全部または一定量を磁製蒸発皿またはビーカーに正確にとり、水浴上で蒸発乾固する。これに塩酸（１＋１）数ｍｌを加えて蒸発乾固することを数回繰り返したのち、１１０～１２０℃の空気浴に入れて十分乾燥脱水し放冷する。次に塩酸（１＋４）約５０ｍｌを加え加熱して溶かしたのち直ちにろ過し、沈殿を温塩酸（１＋１０）で２回洗浄し、次いで熱水で塩化物の反応がなくなるまで洗浄する。沈殿は乾燥・強熱したのち、ケイ酸（ＳｉＯ２）として重さを正確に量り、またはこれに係数０．４６７４を乗じてケイ素（Ｓｉ）の量を算出する。
（付記）
１．ろ液中に漏れたケイ素については、必要に応じて再分離し結果を補正する。
２．重さを量った沈殿に不純物が混入すると思われる場合には、この沈殿を少量の硫酸（１＋３）で潤し、４６％フッ化水素酸３～５ｍｌを加え注意して加熱しケイ素及び硫酸を揮散させ、ケイ素が残留すれば更にこの操作を反復してそのことごとくを揮散させたのち、強熱し重さを正確に量ってその減量をケイ酸（ＳｉＯ２）の量とする。
４．４．２ 過塩素酸法
Ａ 適用範囲
ケイ酸質肥料を主な対象とするが、その他の試料でもケイ素の分離あるいは定量に広く応用できる。クエン酸など有機物が共存する場合にはその分解を兼ねることができる。ただし有機物の多い場合には爆発の危険があるために、硝酸などで予備的に分解しておくのがよい。
Ｂ 試料液の調製
４．４．１．Ｂによる。
Ｃ 定量
試料液の全量または一定量をトールビーカーに正確にとり、過塩素酸１０ｍｌを加え加熱、蒸発し、過塩素酸の白煙が発生するようになったならば時計皿で覆い、なお１５～２０分間加熱を続ける。放冷後塩酸（１＋１０）約５０ｍｌを加え７０～８０℃で数分間加熱したのち、４．４．１．Ｃの「直ちにろ過し」以下によりケイ素（ケイ酸）を定量する。
（付記）
リン鉱石の場合には、分析試料１ｇをビーカーに正確にとり、ホウ酸１ｇ及び水約２０ｍｌを加え、加熱してホウ酸の大部分を溶かす。放冷後、過塩素酸２０ｍｌを加え、次いで上記の「加熱、蒸発し」以下により、ケイ素（ケイ酸）を定量する。なお、この場合には重さを量った沈殿中に不純物が混入することが多いので、４．４．１．Ｃ．（付記）２．に従って補正した値をケイ素（ケイ酸）の量とするのがよい。
４．４．３ フッ化カリウム法
Ａ 適用範囲
ケイ酸質肥料の可溶性ケイ素（ケイ酸）の定量に適する。ケイ素（ケイ酸）全量の場合にはアルカリ融解剤として水酸化ナトリウムを使用するとよい。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準水酸化ナトリウム液
水酸化ナトリウムの０．１Ｍ溶液を作成し、４．１．１．１．Ｂ．１）によりその濃度を標定し１ｍｌに相当するケイ素（Ｓｉ）またはケイ酸（ＳｉＯ２）の量を算出する。
２）フッ化カリウム液
フッ化カリウム５８ｇを水１０００ｍｌに溶かしポリエチレン瓶に貯蔵する。
３）塩化カリウム液
塩化カリウム１５０ｇを、水７５０ｍｌ及びアルコール２５０ｍｌの混合液に溶かし、メチルレッドを指示薬として少量の塩酸を滴下して酸性とし、１日間放置後標準水酸化ナトリウム液で中和する。
４）指示薬
ｉ）メチルレッド
４．１．１．１．Ｂ．４）．ｉｉ）による。
ｉｉ）フェノールフタレイン
Ｃ 試料液の調製
４．４．１．Ｂによる。
Ｄ 定量
試料液の一定量（Ｓｉとして１０～２５ｍｇまたはＳｉＯ２として２０～５０ｍｇがよく、液量２５ｍｌ以下）を２００ｍｌ容のポリエチレン製ビーカーに正確にとり、塩酸１０ｍｌ及びフッ化カリウム液１５ｍｌを加え、更に塩化カリウム２ｇを加えかき混ぜて溶かす。次に冷蔵庫中で約３０分間冷却したのち、ポリエチレン製グーチるつぼにろ紙を敷いてろ別し、塩化カリウム液で中性になるまで洗浄する。ろ紙上の沈殿はろ紙とともに水で３００ｍｌ容のビーカーに移して約２００ｍｌに希釈し、７０～８０℃に加熱したのち、フェノールフタレインを指示薬として標準水酸化ナトリウム液で滴定し、ケイ素（Ｓｉ）またはケイ酸（ＳｉＯ２）の量を算出する。
０．１Ｍ水酸化ナトリウム液１ｍｌ＝０．７０２１ｍｇＳｉ＝１．５０２１ｍｇＳｉＯ２
（付記）
沈殿がろ紙から漏れるおそれのある場合には、ろ紙を細かくちぎり、水を加えてかき混ぜ、繊維状としたろ紙くず（液）をろ紙上に薄く敷いてろ別するとよい。
４．５ カルシウム（石灰）及びアルカリ分
４．５．１ カルシウム（石灰）
４．５．１．１ シュウ酸アンモニウム法
Ａ 適用範囲
カルシウムを含有する肥料に適用する。本法は同時にカルシウムの除去に用いることもでき、４．６．１によりマグネシウムを定量する際の前処理に応用できる。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準過マンガン酸カリウム液
過マンガン酸カリウム（ＫＭｎＯ４）３．１６ｇを水約８００ｍｌに溶かして煮沸し、水を加えて１０００ｍｌとし１～２日間放置したのち漏斗形ガラスろ過器（Ｇ４）でろ過し０．１Ｍ（１／５ＫＭｎＯ４）溶液を作成して着色瓶に貯蔵し、次の方法によりその濃度を標定する。
標準試薬シュウ酸ナトリウム（Ｎａ２Ｃ２Ｏ４；１５０～２００℃に１～１．５時間保ち硫酸デシケーター中で放冷したもの）０．３ｇをビーカーに正確にとり、あらかじめ煮沸してから２５～３０℃に冷却した硫酸（１＋２０）約２５０ｍｌを加えて溶かす。これに標準過マンガン酸カリウム液約４０ｍｌを穏やかにかき混ぜながら急速に加え、過マンガン酸の色を完全に消失させたのち５５～６０℃に加温する。更に滴定を続け最後の１～１．５ｍｌはゆっくりと加え、溶液が微紅色となったときを終点として（着色して３０秒以内に消えるものであってはならない）その濃度を標定する。
シュウ酸ナトリウム０．３ｇ＝０．１Ｍ（１／５ＫＭｎＯ４）液４４．７８ｍｌ
２）シュウ酸アンモニウム液
シュウ酸アンモニウム〔（ＮＨ４）２Ｃ２Ｏ４・Ｈ２Ｏ〕の飽和液を作成する。
３）ペルオキソ二硫酸アンモニウム（過硫酸アンモニウム）液
ペルオキソ二硫酸アンモニウム〔（ＮＨ４）２Ｓ２Ｏ８〕２０ｇを水に溶かして１００ｍｌとする。使用直前に作成するのがよい。
Ｃ 試料液の調製
ａ カルシウム（石灰）全量
１）無機質肥料
分析試料２．５～５ｇをトールビーカーに正確にとり、塩酸約３０ｍｌ及び硝酸約１０ｍｌを加えて約３０分間煮沸し、放冷後水を加えて正確に２５０～５００ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する。
２）有機質肥料または有機物を含有する肥料 ４．３．１．Ｃ．ａ．３）による。
ｂ 可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）カルシウム（石灰）
分析試料２ｇをトールビーカーに正確にとり、０．５Ｍ塩酸２００ｍｌを加え時計皿で覆い５分間煮沸して溶かし、冷却後水を加えて正確に２５０～５００ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する。
（付記）
多量のマグネシウム（ＭｇＯとして約７０％以上）を含有し上記の方法では０．５Ｍ塩酸の量が不足する場合には、分析試料を１～１．５ｇとする必要がある。
Ｄ 定量
試料液の一定量をビーカーに正確にとり、あらかじめ４．４．１．Ｃまたは４．４．２．Ｃに従ってケイ素を除去し、更にマンガン含量の高い場合にはアンモニア水で微酸性に中和したのちペルオキソ二硫酸アンモニウム液約２０ｍｌを加えて煮沸して二酸化マンガンを生成させ、これをろ過し、熱水で洗浄して除去する。ここで得られたろ液の全量またはその一定量を正確にビーカーに分取し（Ｃａとして１５～７０ｍｇまたはＣａＯとして２０～１００ｍｇがよい）、アンモニア水を加えて中和し、塩化アンモニウム１～２ｇとやや過剰の酢酸アンモニウムとを加え煮沸・ろ過・熱水洗浄して鉄及びアルミニウムを除去したのち、シュウ酸アンモニウム液を加え激しくかき混ぜてシュウ酸カルシウムを沈殿させ、水浴上で０．５～２時間加熱したのち、ろ過して熱水で洗浄する。ろ紙上の沈殿はろ紙とともに元のビーカーに移し、硫酸（１＋５）約５０ｍｌ及び熱水約１５０ｍｌを加えて溶かし、６０～７０℃に加熱しろ紙を崩さないようにして標準過マンガン酸カリウム液で滴定し、溶液が微紅色となったときを終点として（着色して３０秒以内に消失するものであってはならない）カルシウム（Ｃａ）または酸化カルシウム（石灰）（ＣａＯ）の量を算出する。
０．１Ｍ（１／５過マンガン酸カリウム）液１ｍｌ＝２．００４ｍｇＣａ＝２．８０４ｍｇＣａＯ
４．５．１．２ 原子吸光測光法
Ａ 適用範囲
本法は比較的カルシウム含有量の低い試料に特に好適であり、含有量の高い場合にはやや誤差が大きい。
Ｂ 装置
原子吸光分析装置 カルシウム中空陰極ランプ。
Ｃ 試薬液の調製
１）標準カルシウム液
特級炭酸カルシウム（ＣａＣＯ３；１１０℃で乾燥したもの）２．４９７ｇを１０００ｍｌのメスフラスコにとり、塩酸（１＋３）２０ｍｌに溶かしたのち標線まで水を加えて標準カルシウム原液を作成する（この液１ｍｌはＣａとして１ｍｇを含有する）。使用に際してこの原液の一定量を水で正確に１０倍に希釈する（この液１ｍｌはＣａとして１００μｇを含有する）。
なお標準カルシウム液として炭酸カルシウム１．７８５ｇを同様に塩酸（１＋３）に溶かし正確に水で１０００ｍｌとした液を原液とし（この液１ｍｌはＣａＯとして１ｍｇを含有する）、この液を使用に際して水で正確に１０倍に希釈してもよい（この液１ｍｌはＣａＯとして１００μｇを含有する）。
２）干渉抑制剤液
塩化ストロンチウム（ＳｒＣｌ２・６Ｈ２Ｏ）６０．９～１５２．１ｇを水及び塩酸４２０ｍｌに溶かし１０００ｍｌとする。あるいは塩化ストロンチウムの代わりに塩化ランタン（ＬａＣｌ３・７Ｈ２Ｏ）５３．５ｇを用いてもよい。
Ｄ 試料液の調製
４．５．１．１．Ｃによる。
Ｅ 定量
試料液の一定量（Ｃａとして０．３～４ｍｇまたはＣａＯとして０．５～６ｍｇがよい）を１００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、干渉抑制剤液１０ｍｌを加え標線まで水を加え、原子吸光分析装置により波長４２２．７ｎｍの吸光度を測定する。同時に標準カルシウム液を数段階に正確にとり、これに干渉抑制剤液を最終液量の１／１０ずつ添加し正確に一定濃度に希釈した液につき試料液と同一条件で吸光度を測定して検量線を作成し、試料中のカルシウム（Ｃａ）または酸化カルシウム（石灰）（ＣａＯ）の量を求める。
４．５．２ アルカリ分
４．５．２．１ 塩酸法
Ａ 適用範囲
生石灰、消石灰、炭酸カルシウムなどに適用する。ケイ素、リン、マンガンなどの含有量の多い試料（ケイ酸カルシウム、熔成りん肥など）には適用できないので、４．５．２．２によるか、４．５．１．１及び４．６．１により可溶性カルシウム及び可溶性マグネシウムを別々に定量し、これらを石灰（ＣａＯ）に換算してその合計量をアルカリ分とする必要がある。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準水酸化ナトリウム液
４．１．１．１．Ｂ．１）により水酸化ナトリウムの０．２５Ｍ溶液を作成し、１ｍｌに相当する石灰（ＣａＯ）の量を算出する。
２）標準塩酸液
塩酸の０．５Ｍ溶液を作成し、標準水酸化ナトリウム液でその濃度を標定する。
３）指示薬
フェノールフタレイン ４．１．５．１．Ｂ．５）．ｉｉｉ）による。
Ｃ 試料液の調製
分析試料１ｇをトールビーカーに正確にとり、標準塩酸液１００ｍｌを正確に加えて時計皿で覆い５分間煮沸する。この際必要があればろ過して熱水で洗浄しろ液及び洗浄液を集める。
（付記）
標準塩酸液は少なくともその約１／３が過剰になるように加える必要があり、不足するときは分析試料の量を適宜減らす必要がある。
Ｄ 定量
試料液の全量、または水で正確に２００ｍｌまたは２５０ｍｌに希釈した液の一定量を正確にとり、指示薬としてフェノールフタレイン数滴を加えて標準水酸化ナトリウム液で余剰の塩酸を滴定し、分析試料１００部を中和するのに要する標準塩酸液の量に相当する標準水酸化ナトリウム液の量を算出し、その量を酸化カルシウム（ＣａＯ）の量に換算してアルカリ分とする。
０．２５Ｍ水酸化ナトリウム液１ｍｌ＝７．０１０ｍｇＣａＯ
（付記）
カルシウム（Ｃａ）、マグネシウム（Ｍｇ）、酸化マグネシウム（ＭｇＯ）より酸化カルシウム（ＣａＯ）に換算するには次の係数を用いる。
ＣａＯ＝Ｃａ×１．３９９２＝Ｍｇ×２．３０７３＝ＭｇＯ×１．３９１４
４．５．２．２ エチレンジアミン四酢酸塩法
Ａ 適用範囲
カルシウム及びマグネシウムを含む肥料に適用することができる。ただしマンガンが特に多い肥料では、４．５．１．１．Ｄに従ってあらかじめこれを除去することが必要である。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準亜鉛液
標準試薬亜鉛（Ｚｎ）〔塩酸（１＋３）、水、アセトンで順次洗い、直ちに無水塩化カルシウムデシケーターまたは硫酸デシケーター中で２４時間以上乾燥したもの〕０．６５～０．６６ｇを１０００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、塩酸１０ｍｌを加えて溶かし、標線まで水を加えて０．０１Ｍ溶液（０．６５３７ｇＺｎ／ｌ）を作成する。
２）標準エチレンジアミン四酢酸塩液
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（Ｎａ２Ｈ２Ｃ１０Ｈ１２N２Ｏ８・２Ｈ２Ｏ）３．７２ｇを水に溶かして１０００ｍｌとし約０．０１Ｍ溶液を作成し、次の方法によりその濃度を標定し、１ｍｌに相当する酸化カルシウム（ＣａＯ）の量を算出する。
標準亜鉛液２５ｍｌを三角フラスコに正確にとり、水約１５ｍｌ及び塩化アンモニウム緩衝液約５ｍｌを加え、エリオクロムブラックＴを指示薬として標準エチレンジアミン四酢酸塩液で滴定する。
３）標準マグネシウム液
特級マグネシウム（Ｍｇ）０．２４３ｇを塩酸１０ｍｌに溶かし、適量の水を加えメチルレッドを指示薬として希アンモニア水で中和したのち水を加えて１０００ｍｌとする。その濃度は標準マグネシウム液２５ｍｌを三角フラスコに正確にとり、水約１５ｍｌ及び塩化アンモニウム緩衝液約５ｍｌを加え、エリオクロムブラックＴを指示薬として標準エチレンジアミン四酢酸塩液で滴定して標定する。
４）緩衝液
ｉ）塩化アンモニウム緩衝液
塩化アンモニウム７０ｇ及びアンモニア水５７０ｍｌを水に溶かして１０００ｍｌとする。
ｉｉ）２－アミノエタノール緩衝液
２－アミノエタノール（モノエタノールアミン）１５０ｍｌに水４００ｍｌを加え、これに塩酸約２０ｍｌを徐々に加え、ｐＨを１０．６に調節する。
５）シアン化カリウム液
シアン化カリウム（ＫＣＮ）１００ｇを水に溶かして１０００ｍｌとする。
６）指示薬
ｉ）エリオクロムブラックＴ
エリオクロムブラックＴ０．５ｇ及び塩化ヒドロキシルアンモニウム（塩酸ヒドロキシルアミン）４．５ｇを９５％アルコールに溶かして１００ｍｌとし着色瓶に貯蔵する。
ｉｉ）メチルレッド
４．１．１．１．Ｂ．４）ｉｉ）による。
Ｃ 試料液の調製
４．５．１．１．Ｃ．ｂによる。
（付記）
マンガンが特に多くマスキングでは完全に影響を除けない場合には、あらかじめ４．５．１．１．Ｄによりマンガンを除く必要がある。
Ｄ 定量
試料液の一定量（ＣａＯ＋ＭｇＯとして５～２０ｍｇがよい）を三角フラスコに正確にとり、適量の水を加えメチルレッド１滴を指示薬として希水酸化ナトリウム液で中和し、アスコルビン酸約０．１ｇ（または１０％過酸化水素水２～５ｍｌ）、トリエタノールアミン（１＋３）１～１０ｍｌ及びシアン化カリウム液１～１０ｍｌ（マンガンが存在するときは、シアン化カリウム１～５ｇを加える）を加え、更に標準エチレンジアミン四酢酸塩液の過剰の一定量を正確に加え、次いで塩化アンモニウム緩衝液または２－アミノエタノール緩衝液約２０ｍｌ及び指示薬としてエリオクロムブラックＴ数滴を加えて余剰のエチレンジアミン四酢酸塩を標準マグネシウム液で滴定し、滴定値を酸化カルシウム（ＣａＯ）の量に換算してアルカリ分とする。
０．０１Ｍエチレンジアミン四酢酸塩液１ｍｌ＝０．５６０８ｍｇＣａＯ
なお試料液の一定量に２％クエン酸液約５ｍｌを加えて希水酸化ナトリウム液で中和し、以下前記のようにマスキング剤及び緩衝液を加えたのち、直ちに標準エチレンジアミン四酢酸塩液で滴定してもよい。また試料液にリン酸塩、ケイ酸塩などを含有しない場合には、クエン酸を加えなくても直接滴定することができる。
（付記）
滴定終了後の廃液にはシアン化物が含まれるので、そのまま捨てることはできない。廃液はポリエチレン容器などにため、シアン化物を分解したのちに放流する。分解のためには、廃液に水酸化ナトリウム液を加えてｐＨ１０前後にしたのち、１０００ｍｌにつき高度さらし粉（有効塩素６０％以上）約３０ｇまたは次亜塩素酸ナトリウム液（有効塩素１０～１３％）約１００ｍｌの割合で徐々に加え、１時間以上放置したのち、シアン化物の残存の有無を調べ、分解が終わっていれば大量の水とともに排出する。（あるいは必要により重金属などの除去処理工程に移す。）
４．５．２．３ 原子吸光測光法
Ａ 適用範囲
カルシウム及びマグネシウムを含有する肥料に適用する。
Ｂ 装置
原子吸光分析装置 カルシウム中空陰極ランプ及びマグネシウム中空陰極ランプ。
Ｃ 試薬液の調製
Ｄ 試料液の調製
４．５．１．１．Ｃ．ｂによる。
Ｅ 定量
４．５．１．２．Ｅにより酸化カルシウム（石灰）（ＣａＯ）の量を求め、４．６．２．Ｅにより酸化マグネシウム（苦土）（ＭｇＯ）の量を求める。後者の量に係数１．３９１４を乗じて酸化カルシウム（ＣａＯ）の量に換算し、前者との合計量をアルカリ分とする。
４．６ マグネシウム（苦土）
４．６．１ エチレンジアミン四酢酸塩法
Ａ 適用範囲
マグネシウムを含有する肥料及び肥料原料に適用する。少量のマンガンの共存はシアン化カリウムの添加によりマスキングできるが、多量の場合にはあらかじめ４．５．１．１．Ｄに従って除去することが必要である。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準亜鉛液
４．５．２．２．Ｂ．１）による。
２）標準エチレンジアミン四酢酸塩液
４．５．２．２．Ｂ．２）による。ただしその濃度を標定して１ｍｌに相当するマグネシウム（Ｍｇ）または酸化マグネシウム（ＭｇＯ）の量を算出する。
３）標準マグネシウム液
４．５．２．２．Ｂ．３）による。
４）シュウ酸アンモニウム液
４．５．１．１．Ｂ．２）による。
５）緩衝液
４．５．２．２．Ｂ．４）による。
６）シアン化カリウム液
４．５．２．２．Ｂ．５）による。
７）指示薬
ｉ）エリオクロムブラックＴ
４．５．２．２．Ｂ．６）．ｉ）による。
ｉｉ）メチルレッド
４．１．１．１．Ｂ．４）．ｉｉ）による。
Ｃ 試料液の調製
ａ マグネシウム（苦土）全量
４．５．１．１．Ｃ．ａによる。
ｂ 水溶性マグネシウム（苦土）
分析試料１ｇを５００ｍｌ容の三角フラスコに正確にとり、水約４００ｍｌを加え還流冷却器を付けて３０分間煮沸し、冷却後水を加えて正確に５００ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する。
ｃ 可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）マグネシウム（苦土）
４．５．１．１．Ｃ．ｂによる。
ｄ ク溶性（クエン酸可溶性）マグネシウム（苦土）
４．２．１．Ｃ．ｄによる。
（付記）
１．多量のマグネシウム（ＭｇＯとして約７０％以上）を含有し、上記の方法ではクエン酸液の量が不足する場合には、分析試料を１ｇの代わりに０．５ｇとして試料液を作成する必要がある。
２．原料としてキーゼリットを使用した複合肥料でク溶性マグネシウム（苦土）を定量する場合には、上記のｂの水溶性マグネシウム（苦土）の試料液作成の際に得られる不溶解物を水で洗浄後２５０ｍｌのメスフラスコに移し、次に４．２．１．Ｃ．ｄの「３０℃のクエン酸液１５０ｍｌを加え」以下に従って試料液を作成する。この浸出液中のマグネシウム（苦土）の量と水溶性マグネシウム（苦土）の量を合計してク溶性マグネシウム（苦土）の量とする。
３．マンガンが特に多くマスキングでは完全に影響を除けない場合には、あらかじめ４．５．１．１．Ｄによりマンガンを除く必要がある。
Ｄ 定量
ａ クエン酸を含有しない場合
試料液の一定量（Ｍｇとして６～３０ｍｇまたはＭｇＯとして１０～５０ｍｇがよい）を２５０ｍｌのメスフラスコに正確にとり、塩化アンモニウム約１ｇ及び水を加えて約１５０ｍｌとし、メチルレッドを指示薬として希アンモニア水及び希塩酸で溶液の色が淡桃色（ｐＨ約５）となるように中和し、加熱して振り混ぜながらシュウ酸アンモニウム液約２０ｍｌを加える（この際淡桃色が変化するので希塩酸及び希アンモニア水で再びｐＨを調整する）。次に水浴上で１時間加熱したのち室温まで放冷し（必要があれば更にメチルレットを加えてｐＨを調整する）、標線まで水を加えて細密な乾燥ろ紙でろ過する。このろ液２５～１００ｍｌを三角フラスコに正確にとり、５０ｍｌ未満のときは水を加えて約５０ｍｌとし、アスコルビン酸約０．１ｇ（または１０％過酸化水素水２～５ｍｌ）、トリエタノールアミン（１＋３）１～１０ｍｌ、シアン化カリウム液１～１０ｍｌ（マンガンが存在するときはシアン化カリウム１～５ｇを加える）及び２－アミノエタノール緩衝液（あるいは滴定液にあらかじめ２％クエン酸液約５ｍｌを加えておき塩化アンモニウム緩衝液）約２０ｍｌを加え、更に指示薬としてエリオクロムブラックＴ数滴を加え、標準エチレンジアミン四酢酸塩液で滴定してマグネシウム（Ｍｇ）または酸化マグネシウム（苦土）（ＭｇＯ）の量を算出する。
０．０１Ｍエチレンジアミン四酢酸塩液１ｍｌ＝０．２４３５ｍｇＭｇ＝０．４０３０ｍｇＭｇＯ
なお前記のろ液の一定量にマスキング剤を加えたのち、標準エチレンジアミン四酢酸塩液の過剰の一定量を正確に加え、更に緩衝液及び指示薬を加えて標準マグネシウム液で逆滴定してもよい。
ｂ クエン酸を含有する場合
試料液１００ｍｌを２５０ｍｌのメスフラスコに正確にとり、塩化アンモニウム約１ｇ及び水を加えて約１５０ｍｌとし、メチルレッドを指示薬として希アンモニア水及び希塩酸で溶液が淡桃色（ｐＨ約５）となるように中和し、加熱して振り混ぜながらシュウ酸アンモニウム液２０～５０ｍｌを加え、以下前記ａによりカルシウムを除去したのちそのろ液２５ｍｌを三角フラスコに正確にとり、水を加えて約５０ｍｌとしたのち、前記ａの「アスコルビン酸約０．１ｇ」以下により（ただしクエン酸液は添加しない）マグネシウム（苦土）を定量する。
（付記）
滴定終了後の廃液の処理については、４．５．２．２．Ｄ．（付記）による。
４．６．２ 原子吸光測光法
Ａ 適用範囲
マグネシウムは原子吸光測光法の感度が高く、最も測定しやすい元素の一つであり、測定誤差も比較的小さい。
Ｂ 装置
原子吸光分析装置 マグネシウム中空陰極ランプ。
Ｃ 試薬液の調製
１）標準マグネシウム液
特級マグネシウム（Ｍｇ）１ｇを１０００ｍｌのメスフラスコにとり、塩酸１０ｍｌを静かに加えて溶かし、放冷後標線まで水を加えて標準マグネシウム原液を作成する（この液１ｍｌはＭｇとして１ｍｇを含有する）。使用に際してこの原液の一定量を水で正確に１０倍に希釈する（この液１ｍｌはＭｇとして１００μｇを含有する）。
なお標準マグネシウム液として特級マグネシウム（Ｍｇ）０．６０３０ｇを同様に塩酸に溶かして正確に水で１０００ｍｌとした液を原液とし（この液１ｍｌはＭｇＯとして１ｍｇを含有する）、この液を使用に際して水で正確に１０倍に希釈してもよい（この液１ｍｌはＭｇＯとして１００μｇを含有する）。
２）干渉抑制剤液
４．５．１．２．Ｃ．２）による。
Ｄ 試料液の調製
４．６．１．Ｃによる。
Ｅ 定量
試料液の一定量（Ｍｇとして５０～５００μｇ、またはＭｇＯとして８０～８００μｇがよい）を１００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、干渉抑制剤液１０ｍｌを添加したのち標線まで水を加え、原子吸光分析装置により波長２８５．２ｎｍの吸光度を測定する。同時に標準マグネシウム液を数段階に正確にとり、試料液の場合と同一濃度になるように干渉抑制剤液をそれぞれ添加し同一条件で測光して作成した検量線からマグネシウム（Ｍｇ）または酸化マグネシウム（苦土）（ＭｇＯ）の量を求める。
４．７ マンガン
４．７．１ ビスマス酸ナトリウム法
Ａ 適用範囲
マンガン含有量の比較的高い肥料（Ｍｎとしておおよそ１％以上）に適する。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準過マンガン酸カリウム液
４．５．１．１．Ｂ．１）による。
２）標準硫酸鉄（Ⅱ）アンモニウム液
硫酸鉄（Ⅱ）アンモニウム〔ＦｅＳＯ４・（ＮＨ４）２ＳＯ４・６Ｈ２Ｏ〕の０．１Ｍ溶液を作成し〔硫酸鉄（Ⅱ）アンモニウム３９．３ｇを適量の水に溶かし、硫酸（１＋１）１００ｍｌを加えて１０００ｍｌとする〕着色瓶に貯蔵する。
３）クエン酸液
４．２．１．Ｂ．４）による。
Ｃ 試料液の調製
ａ マンガン全量
分析試料１～２．５ｇをビーカーに正確にとり水で潤してから、時計皿で覆い塩酸約２０ｍｌを加えて加熱分解したのち、硝酸約５ｍｌを加え徐々に加熱して完全に分解し、更に硫酸（１＋１）１０ｍｌを加えて蒸発し、硫酸の白煙が発生し始めてから更に約１０分間加熱を続け、少時放冷後ビーカーの内壁を少量の水で洗浄し、再び蒸発して硫酸の白煙が発生してから約１０分間加熱を続ける。放冷後水約５０ｍｌを加えて加熱して溶かし、ろ過して熱水で十分に洗浄しろ液は２５０ｍｌのメスフラスコに受ける。この不溶解物になおマンガンを含有するときには、ろ紙とともに白金るつぼに移し、強熱、灰化後、不溶解物の約６倍量の無水炭酸ナトリウム（または無水炭酸ナトリウムと無水炭酸カリウムとの等量混合物）を加え混合して融解し、冷却後温水を用いてるつぼからビーカーに洗い移し、硝酸（１＋１）を加えて酸性として溶かし、さきの主溶液に合し標線まで水を加える。
ｂ 水溶性マンガン
４．２．１．Ｃ．ｂによる。
ｃ 可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）マンガン
４．５．１．１．Ｃ．ｂによる。
ｄ ク溶性（クエン酸可溶性）マンガン
４．２．１．Ｃ．ｄによる。
Ｄ 定量
ａ マンガン全量
試料液の一定量（Ｍｎとして４～４０ｍｇ、またはＭｎＯとして５～５０ｍｇがよい）をトールビーカーに正確にとり、水を加えて約１００ｍｌとし、これに硝酸１５ｍｌを加えたのち、ビスマス酸ナトリウムをごく少量添加してかき混ぜ１～２分間軽く煮沸する。この際過マンガン酸の赤紫色若しくは二酸化マンガンの沈殿が消失したならば、少時冷却後更にビスマス酸ナトリウムを少量添加して軽く煮沸する。次に３０％過酸化水素水１～２滴を滴下して着色若しくは沈殿を消失させ再び煮沸する。冷却後マンガン量に応じてビスマス酸ナトリウム０．５～１．５ｇを一度に加えよくかき混ぜて静置したのち、漏斗型ガラスろ過器（１１Ｇ４）でろ過し硝酸（１＋３０）で洗浄する。ろ液は水約１５０ｍｌを加えて希釈し、これに標準硫酸鉄（Ⅱ）アンモニウム液２５～５０ｍｌを正確に加えて過マンガン酸の赤紫色を消失させ、標準過マンガン酸カリウム液で滴定する。同時に同一量の標準硫酸鉄（Ⅱ）アンモニウム液について空試験を行い、両滴定値の差よりマンガン（ＭｎまたはＭｎＯ）の量を算出する。
０．１Ｍ（１／５過マンガン酸カリウム液）１ｍｌ＝１．０９９ｍｇＭｎ＝１．４１９ｍｇＭｎＯ
ｂ 水溶性マンガン、可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）マンガン及びク溶性（クエン酸可溶性）マンガン
試料液の一定量（Ｍｎとして４～４０ｍｇ、またはＭｎＯとして５～５０ｍｇがよい）をトールビーカーに正確にとり、硫酸５ｍｌ及び硝酸約３０ｍｌを加え加熱・蒸発し硫酸の白煙が発生するに至ったのち、更に少量の硝酸を滴下して加熱を続け有機物を完全に分解する。放冷後温水５０ｍｌを加えよくかき混ぜたのち、不溶解物をろ別し熱水で洗浄する。ろ液はビーカーに受け約１００ｍｌに濃縮し、次に前記ａの「これに硝酸１５ｍｌを加えたのち」以下に従って操作しマンガン（ＭｎまたはＭｎＯ）の量を求める。
（付記）
試料液中に塩化物や有機物が存在しないときは、硫酸及び硝酸による分解操作を省略してよい。
４．７．２ 過ヨウ素酸カリウム法
Ａ 適用範囲
マンガンを含有する試料に適用する。
Ｂ 装置
吸光光度分析装置
Ｃ 試薬液の調製
１）標準マンガン液
特級過マンガン酸カリウム（ＫＭｎＯ４）０．２８７７ｇを水約１００ｍｌに溶かし、硫酸（１＋１）１ｍｌを加え、次に亜硫酸水または３％過酸化水素水を過マンガン酸の色が消えるまで加えて煮沸し、冷却後水を加えて正確に１０００ｍｌとする。
あるいは電解金属マンガン（Ｍｎ）０．１ｇをビーカーに正確にとり、硫酸（１＋３）１０ｍｌを加えて加熱して溶かし、冷却後水を加えて正確に１０００ｍｌとする（これらの液１ｍｌはＭｎとして１００μｇを含有する）。
２）三混酸
硝酸５００ｍｌに過塩素酸２００ｍｌ及び硫酸１００ｍｌを順次加える。
３）硫酸－リン酸液
水約５００ｍｌにリン酸１００ｍｌ及び硫酸２５０ｍｌを順次加え、冷却後水を加えて１０００ｍｌとする。
４）クエン酸
４．２．１．Ｂ．４）による。
Ｄ 試料液の調製
４．７．１．Ｃによる。
Ｅ 定量
ａ マンガン全量
ろ液の一定量（Ｍｎとして１～１０ｍｇがよい）を小型ビーカーに正確にとり、硫酸－リン酸液２０ｍｌ及び水を加えて約８０ｍｌとし、時計皿で覆い加熱する。沸点近くに達したならば熱板上より降ろし、過ヨウ素酸カリウム（ＫＩＯ４）約０．３ｇを加え、水浴上で約３０分間加熱する。放冷後水で１００～２５０ｍｌのメスフラスコに移し、標線まで水を加える。別に標準マンガン液の一定量を数段階に小型ビーカーに正確にとり、同様に操作して発色させたのち正確に１００ｍｌとする。次に試料液のマンガン濃度よりも０．５～１．５ｍｇＭｎ／１００ｍｌだけ低い濃度の発色標準マンガン液を対照液として試料液及び対照液よりも高い濃度の発色標準マンガン液の吸光度（０．２～０．７の範囲がよい）を波長５２６ｎｍ付近で測定し、試料液中のマンガン（Ｍｎ）の量を求め、またはこれよりマンガン（ＭｎＯ）の量を算出する。
マンガン（ＭｎＯ）＝マンガン（Ｍｎ）×１．２９１２
ｂ 水溶性マンガン、可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）マンガン及びク溶性（クエン酸可溶性）マンガン
試料液の一定量（Ｍｎとして５～５０ｍｇがよい）をトールビーカーに正確にとり、硫酸５ｍｌ及び硝酸約３０ｍｌ、あるいは三混酸１０～２０ｍｌを加えて加熱し、硫酸あるいは過塩素酸の白煙が発生するようになったならば時計皿で覆い更に約１０分間加熱する。なお、有機物などの分解が不完全なときは、少時冷却したのち少量の硝酸を滴下して加熱を続け完全に分解する。この際マンガンが酸化されて赤紫色を呈するときは、分解後３％過酸化水素水１～２滴及び少量の水を加えて煮沸し赤紫色を消失させる。放冷後水約５０ｍｌを加え煮沸して溶かし、冷却後水を加えて正確に２５０ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する。このろ液の一定量（Ｍｎとして１～１０ｍｇがよい）を小型ビーカーに正確にとり、次に前記ａの「硫酸－リン酸液約２０ｍｌ」以下により操作してマンガン（Ｍｎ）の量を求める。
（付記）
試料液中に有機物または多量の塩化物が存在しないときは、硫酸及び硝酸、あるいは三混酸による分解操作を省略してよい。
４．７．３ 原子吸光測光法
Ａ 適用範囲
マンガンを含有する肥料及びリン鉱石を対象とする。
Ｂ 装置
原子吸光分析装置 マンガン中空陰極ランプ。
Ｃ 試薬液の調製
１）標準マンガン液
４．７．２．Ｃ．１）による。
２）干渉抑制剤液
４．５．１．２．Ｃ．２）による。
３）クエン酸液
４．２．１．Ｂ．４）による。
Ｄ 試料液の調製
ａ マンガン全量
４．７．１．Ｃ．ａによる。
（付記）
リン鉱石の場合は５．１．１．Ｄ．ａ．１）によってもよい。
ｂ 水溶性マンガン
４．２．１．Ｃ．ｂによる。
ｃ 可溶性（０．５Ｍ塩酸可溶性）マンガン
４．５．１．１．Ｃ．ｂによる。
ｄ ク溶性（クエン酸可溶性）マンガン
４．２．１．Ｃ．ｄによる。
Ｅ 定量
試料液の一定量（Ｍｎとして５０～１０００μｇがよい）を１００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、干渉抑制剤液１０ｍｌ及び水を標線まで加え、原子吸光分析装置により２７９．５ｎｍの吸光度を測定する。同時に標準マンガン液の一定量を数段階に１００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、試料液の場合と同様に操作して作成した検量線からマンガン（Ｍｎ）の量を求め、またはこれよりマンガン（ＭｎＯ）の量を算出する。
マンガン（ＭｎＯ）＝マンガン（Ｍｎ）×１．２９１２
４．８ ホウ素
４．８．１ マンニトール法
Ａ 適用範囲
ホウ素含有量の高い試料に適し、特にホウ酸、ホウ酸ナトリウムなどの分析に好適である。ホウ素入り複合肥料ではリンなどの妨害物質の除去操作が煩雑であり、また含有量も低いことから、本法の適用は困難が多く、４．８．２または４．８．３を適用するのがよい。
Ｂ 試薬液の調製
１）標準ホウ酸液
特級ホウ酸（Ｈ３ＢＯ３）（硫酸デシケーター中で２４時間以上乾燥したもの）６．１８３ｇを水に溶かして正確に１０００ｍｌとし０．１Ｍ溶液を作成する。
２）標準水酸化ナトリウム液
４．１．１．１．Ｂ．１）により０．１Ｍまたは０．０３Ｍ溶液を作成する。ただしその濃度は次記Ｄ．ａの定量法により標準ホウ酸液を滴定して標定する（試料液のホウ素含有量の多少により０．１Ｍまたは０．０３Ｍ溶液を作成する）。
３）クエン酸液
４．２．１．Ｂ．４）による。
４）塩化バリウム液
４．１．１．１．Ｂ．３）による。
５）水酸化ナトリウム液
水酸化ナトリウム１００ｇを水に溶かして１０００ｍｌとする。
６）炭酸ナトリウム液
無水炭酸ナトリウム５０ｇを水に溶かして１０００ｍｌとする。
７）指示薬
ｉ）メチルレッド
４．１．１．１．Ｂ．４）．ｉｉ）による。
ｉｉ）フェノールフタレイン
Ｃ 試料液の調製
ａ 水溶性ホウ素
１）ホウ酸・ホウ酸塩
分析試料１ｇをトールビーカーに正確にとり、水約２００ｍｌを加えて時計皿で覆い１５分間煮沸して溶かし、冷却後水を加えて正確に２５０ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する。
２）塩化カリウム（加里）
分析試料５～１０ｇをビーカーに正確にとり、水５０～７５ｍｌを加えて（分析試料中に炭酸塩が存在する場合にはやや過剰の塩酸を加える）時計皿で覆い１５分間煮沸して溶かす。
３）複合肥料
分析試料２．５ｇを軟質ガラス製またはポリ四フッ化エチレン製トールビーカーに正確にとり、水約２００ｍｌを加えて時計皿で覆い１５分間煮沸して溶かし、冷却後水を加えて正確に２５０ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する。
ｂ ク溶性（クエン酸可溶性）ホウ素
分析試料１ｇを三角フラスコに正確にとり、水２５ｍｌを加えてよく混合し更に塩酸２５ｍｌを加えたのち、還流冷却器を付けて１５分間煮沸し、冷却後水を加えて正確に２５０ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する（このろ液を第１液とする）。
別に分析試料１ｇを三角フラスコに正確にとり、３０℃のクエン酸液１５０ｍｌを加え１分間３０～４０回回転の振り混ぜ機で１時間振り混ぜたのち（浸出中は３０℃に保つこと）、ろ過して水で十分洗浄する。ろ紙上の不溶解物は温塩酸（１＋１）５０ｍｌ及び少量の水で元の三角フラスコに洗い込み、還流冷却器を付けて１５分間煮沸し、冷却後水を加えて正確に２５０ｍｌとし乾燥ろ紙でろ過する（このろ液を第２液とする）。
Ｄ 定量
ａ 水溶性ホウ素
試料液の一定量〔Ｂとして３～３０ｍｇ、またはＢ２Ｏ３として１０～１００ｍｇであって、塩化カリウム（加里）では試料液全量を用い、複合肥料では１００ｍｌをとる〕をビーカーに正確にとり、メチルレッドを指示薬として塩酸を加えて酸性とし煮沸する。次に硫酸及びリン酸をことごとく沈殿させるのに足りる塩化バリウム液を加え、更に加熱したのちフェノールフタレインを指示薬として水酸化ナトリウム液を加えて弱アルカリ性とし、加熱後ろ過して（沈殿がコロイド状でろ過の困難なときは５種Ａろ紙を用いる）熱水で十分洗浄する。ろ液は約１００ｍｌに濃縮し、塩酸で微酸性としたのち炭酸ナトリウム液を加えて弱アルカリ性とし、加熱後ろ過して熱水で洗浄する。次に塩酸で中性にし更に０．１Ｍ塩酸数ｍｌに相当する量を過剰に加え約５分間煮沸して二酸化炭素をことごとく駆逐したのち、冷水中で冷却し指示薬としてメチルレッド１～２滴を加え、溶液が淡紅色から黄色に変わるまで標準水酸化ナトリウム液で正確に中和する（この際中和点を超えた場合には、０．１Ｍ塩酸数滴を加えて淡紅色にしたのち、標準水酸化ナトリウム液を加えて再び正確に中和する）。この中和した液に中性のマンニトール１～２ｇ及び指示薬としてフェノールフタレイン数滴を加え、溶液が淡紅色を呈するまで標準水酸化ナトリウム液で滴定する。次に溶液に少量のマンニトールを追加しもし紅色が消失するときは、標準水酸化ナトリウム液で更に滴定して淡紅色にする。このようにしてマンニトールを加えても終点に影響を及ぼさなくなるまでこの操作を反復する（試料液のホウ素含有量が少ないときはマンニトールの添加は通常１回で十分である）。マンニトール添加後の滴定に要した標準水酸化ナトリウム液の量からホウ素（ＢまたはＢ２Ｏ３）の量を算出する。なおこの際空試験を行い結果を補正することが必要である。
標準水酸化ナトリウム液１ｍｌ＝同液の濃度（Ｍ）×１０．８１ｍｇＢ＝同液の濃度（Ｍ）×３４．８１ｍｇＢ２Ｏ３
（付記）
試料液中にリン、鉄、アルミニウムが存在しないときは、前記の定量法中のこれらの除去操作は不要である。
ｂ ク溶性（クエン酸可溶性）ホウ素
試料液の第１液及び第２液のそれぞれ５０ｍｌを別々のビーカーに正確にとり、煮沸して硫酸・リン酸液が共存するときは塩化バリウム液を加えて沈殿させたのち、フェノールフタレインを指示薬として水酸化ナトリウム液を加えて弱アルカリ性とし、加熱後ろ過して熱水で十分洗浄する。各ろ液は塩酸で微酸性にしたのち、炭酸ナトリウム液を加えて弱アルカリ性とし加熱後ろ過して熱水で洗浄する。更にメチルレッドを指示薬として希塩酸を加えて中性にし約５０ｍｌに濃縮する。この際沈殿が生じたならば、再びろ過・洗浄・濃縮する。次に前項ａの「０．１Ｍ塩酸数ｍｌに相当する量を過剰に加え」以下により滴定する。第１液及び第２液の各滴定値の差からホウ素（ＢまたはＢ２Ｏ３）の量を算出する。
４．８．２ クルクミン法
Ａ 適用範囲
本法は感度が高いことから微量のホウ素の定量に好適である。ただし妨害となる物質が多いので有機溶媒抽出法によりこれらをあらかじめ除去しておく必要がある。
Ｂ 装置
吸光光度分析装置
Ｃ 試薬液の調製
１）標準ホウ素液
特級ホウ酸（Ｈ３ＢＯ３）（硫酸デシケーター中で２４時間以上乾燥したもの）５．７２０ｇを水に溶かして正確に１０００ｍｌとし標準ホウ素原液を作成する（この液１ｍｌはＢとして１ｍｇを含有する）。この原液の一定量を水で正確に１０００倍に希釈してポリエチレン瓶に貯蔵する（この液１ｍｌはＢとして１μｇを含有する）。
なおホウ酸４．４４１ｇを水に溶かして正確に１０００ｍｌとした液を原液とし（この液１ｍｌはＢ２Ｏ３として２．５ｍｇを含有する）、この液を水で正確に１０００倍に希釈してもよい（この液１ｍｌはＢ２Ｏ３として２．５μｇを含有する）。
２）クルクミン液
クルクミン（天然）０．２ｇをポリエチレンビーカーにとり、酢酸１００ｍｌを加え４０～５０℃に加温して溶かしポリエチレン製容器に貯蔵する。
３）２－エチル－１，３－ヘキサンジオール液
２－エチル－１，３－ヘキサンジオール１００ｍｌをクロロホルムに溶かして１０００ｍｌとする。
４）クエン酸液
４．２．１．Ｂ．４）による。
Ｄ 試料液の調製
ａ 水溶性ホウ素
４．８．１．Ｃ．ａによる。
ｂ ク溶性（クエン酸可溶性）ホウ素
４．２．１．Ｃ．ｄによる。
Ｅ 定量
試料液の一定量（Ｂとして１．５～３０μｇ、またはＢ２Ｏ３として５～１００μｇがよく、液量１０ｍｌ以下）を小型分液漏斗に正確にとり、塩酸（１＋３）１０ｍｌを加え、不足する場合には水を加えて約２０ｍｌとする。これに２－エチル－１，３－ヘキサンジオール液２０ｍｌを正確に加え約１分間激しく振り混ぜて静置後、下層の有機相を分離する。この液の１ｍｌを小型の軟質ガラス製（またはポリエチレン製）ビーカーに正確にとり、クルクミン液１ｍｌと硫酸０．３ｍｌを加え、約１５分間放置する。その後９５％アルコールで５０ｍｌのメスフラスコに移し、標線まで更に９５％アルコールを加え、空試験の液を対照液として波長５５０ｎｍ付近の吸光度を測定する。同時に標準ホウ素液を数段階に正確にとり、試料液の場合と同一条件で操作して作成した検量線からホウ素（ＢまたはＢ２Ｏ３）の量を求める。
ホウ素（Ｂ２Ｏ３）＝ホウ素（Ｂ）×３．２１９９
ホウ素（Ｂ）＝ホウ素（Ｂ２Ｏ３）×０．３１０６
４．８．３ アゾメチンＨ法
Ａ 適用範囲
本法は感度については４．８．２にやや劣るが共存物質の影響が少なく広範囲の試料に適用できる。吸光度の経時変化があることに留意が必要である。
Ｂ 装置
吸光光度分析装置
Ｃ 試薬液の調製
１）標準ホウ素液
４．８．２．Ｃ．１）により作成した標準ホウ素原液を水で正確に１００倍に希釈してポリエチレン瓶に貯蔵する（この液１ｍｌはＢとして１０μｇを含有する）。あるいは１ｍｌにＢ２Ｏ３として２５μｇを含有する液を作成してもよい。
２）アゾメチンＨ液
アゾメチンＨ〔Ｃ６Ｈ４・ＯＨ・ＣＨＮ・Ｃ１０Ｈ４・ＯＨ・（ＳＯ３Ｈ）２〕０．６ｇ及びアスコルビン酸２ｇに水を加え３５～４０℃に加温して溶かし、冷却後水を加えて１００ｍｌとする。この液は使用の直前に作成する。
３）酢酸アンモニウム液
酢酸アンモニウム２５０ｇを水に溶かして５００ｍｌとし、これに硫酸（１＋４）約８０ｍｌを加えｐＨ５．２に調整する。
４）エチレンジアミン四酢酸塩液
エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（Ｎａ２Ｈ２Ｃ１０Ｈ１２N２Ｏ８・２Ｈ２Ｏ）３７．２ｇを水に溶かして１０００ｍｌとする。
（付記）
アゾメチンＨが入手できない場合には次のようにして合成する。１－アミノ－８－ナフトール－３，６－ジスルホン酸一ナトリウム（Ｈ酸）１８ｇに水約１０００ｍｌを加え加熱して溶かす（不溶解物はろ別する）。この液に１０％水酸化カリウム液を加えてｐＨ７としたのち、かき混ぜながら塩酸を滴下してｐＨ１．５とする。この液を約６０℃に加熱し、激しくかき混ぜながら、サリチルアルデヒド２０ｍｌを徐々に加え、６０℃以上に保ちながら１時間以上激しくかき混ぜる。放冷後、冷所に一夜間静置してアゾメチンＨ（赤黄色）を沈殿させる。大型ブフナー漏斗でろ過し、アルコールで５回洗浄し１００℃で３時間乾燥したのち、軽く粉砕後デシケーター中で保存する。
Ｄ 試料液の調製
４．８．２．Ｄによる。
Ｅ 定量
試料液の一定量（Ｂとして１０～２００μｇまたはＢ２Ｏ３として３０～６００μｇがよい）を１００ｍｌのメスフラスコに正確にとり、エチレンジアミン四酢酸塩液２５ｍｌを加え〔このとき必要があればｐＨ計を用いて塩酸（１＋３）または２％水酸化ナトリウム液で中和しｐＨ５．０とする〕、酢酸アンモニウム液１０ｍｌ、アゾメチンＨ液１０ｍｌを順次加え、標線まで水を加えて振り混ぜる。室温で２時間放置したのち、空試験の液を対照液として波長４１５ｎｍ付近の吸光度を測定する。同時に標準ホウ素液を数段階に正確にとり、試料液の場合と同一条件で操作して作成した検量線からホウ素（ＢまたはＢ２Ｏ３）の量を求める。
ホウ素（Ｂ２Ｏ３）＝ホウ素（Ｂ）×３．２１９９
ホウ素（Ｂ）＝ホウ素（Ｂ２Ｏ３）×０．３１０６
（付記）
１．この方法で共存物質の影響がみられる場合には、試料液の一定量（１０ｍｌ以下をとり、Ｂとして１０～２００μｇまたはＢ２Ｏ３として３０～６００μｇがよい）を小型分液漏斗に正確にとり、４．８．２．Ｅの「塩酸（１＋３）１０ｍｌを加え」以下によって溶媒抽出を行い、得られた有機相に２％水酸化ナトリウム液２０ｍｌを加え激しく振り混ぜて静置し、水相を１００ｍｌのメスフラスコに移す。この液にフェノールフタレインを指示薬として加え、塩酸（１＋３）で中和したのち、上記Ｅの「酢酸アンモニウム液１０ｍｌ」以下により操作してホウ素（ＢまたはＢ２Ｏ３）の量を求める。なおこの場合には４．８．２．Ｃ．３）の２－エチル－１，３－ヘキサンジオール液の作成の際のクロロホルムの代わりに４－メチル－２－ペンタノン（イソブチルメチルケトン）を使うのが操作上便利である。
２．ク溶性ホウ素を定量する場合には、試料液中と同量のクエン酸を標準液に加える必要がある。
